《表1 引物名称和序列:尼罗罗非鱼淋巴毒素α基因克隆与表达分析》

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《尼罗罗非鱼淋巴毒素α基因克隆与表达分析》


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根据On-LTα基因全长序列,用Primer Premier 5.0设计引物On-LTα-RT-F、On-LTα-RT-R,内参引物为On-LTα-actin-F和On-LTα-actin-R(表1)。反应体系为10μL,其中模板0.5μL,引物(10μmol/L)各0.5μL,2×SYBR Green Mix(Roche)5μL,双蒸水0.5μL,每个样品设置5个复孔,反应条件为:95℃,10 s;95℃,5 s;58℃,15 s;72℃,20 s;循环35次。实验结果依照2-ΔΔCt法计算[15],用SPSS 20进行统计学分析。