《表1 实验所用引物:尼罗罗非鱼pik3r1基因的克隆和mRNA表达分析》

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《尼罗罗非鱼pik3r1基因的克隆和mRNA表达分析》


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依pik3r1基因编码区利用PrimerPremier 5.0设计引物On-pik3r1-1F、On-pik3r1-2190R(表1),然后进行PCR扩增,反应条件:94℃5 min;94℃30 s,50℃30 s,72℃2 min 10 s,33个循环;72℃10min;4℃下保存,对PCR产物进行电泳检测,目的条带经切胶回收后与pMD18-T载体连接,转化到大肠杆菌(E.coil)DH5α中,最后进行菌落PCR鉴定,阳性克隆送广州生工测序。