《表1 实验所用引物：斑节对虾TRIAP1基因的克隆、表达分析以及调控其表达的miRNAs的筛选》

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《斑节对虾TRIAP1基因的克隆、表达分析以及调控其表达的miRNAs的筛选》

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使用qRT-PCR检测1.2.1所述的斑节对虾11个组织中PmTRI-AP1的表达。PCR反应总体系为12.5μL，其中SYBR Premix Ex Taq（TaKaRa）6.25μL、cDNA模板1μL、上游引物qTRAIP1-F和下游引物qTRI-AP1-R各0.5μL、双蒸水补足至12.5μL。反应条件为94℃预变性30 s；94℃变性15 s，59℃退火延伸30 s，40个循环；溶解温度从65℃升至95℃；40℃冷却5 min。使用Roche Light-Cycler480Ⅱ实时定量PCR仪进行PCR，用2-ΔΔCt法计算基因相对表达量。结果用SPSS 22.0软件分析，表示为“平均值±标准差（X±SD）”，并进行单因素方差（One-Way ANOVA）分析，P<0.05为差异显著。PmTRIAP1基因特异性引物（qTRIAP1-F，qTRIAP1-R）、内参基因EF-1a引物（GenBank:DQ021452.1）见表1。