《表1 本试验所用的引物：韭菜迟眼蕈蚊紫外敏感视蛋白基因的克隆及光强度对其表达量影响》

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《韭菜迟眼蕈蚊紫外敏感视蛋白基因的克隆及光强度对其表达量影响》

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根据转录组测序序列信息，获得韭菜迟眼蕈蚊Bo-uv基因序列，并经NCBI网站序列比对鉴定。利用Primer 5.0软件设计引物（表1），引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成，以合成的cDNA为模板进行常规PCR，对该基因的序列进行验证。20μL常规PCR反应体系：2×Mix Taq 10μL、引物Bo-uv F1/R1或Bo-uv F2/R2（表1）各1μL、模板cDNA 1μL，ddH2O 7μL。反应条件：95℃预变性3 min；95℃变性30 s，55℃退火30 s，72℃延伸30 s，共34个循环；72℃延伸10 min；12℃保存。产物经2%琼脂糖凝胶电泳分离，用MiniBEST Agarose Gel DNA Extrac‐tion Kit回收目的DNA片段，连接到Pmd18-T载体上4℃过夜，连接产物转化到JM109感受态细胞，加800μL无添加抗生素的LB液体培养基于37℃、130 r/min振荡培养1 h，取100μL菌液涂布在LB固体培养基上，先正置30 min，然后倒置培养10 h。待菌落长出后随机挑取5个单菌落，接种于1 mL LB液体培养基中，于37℃摇床培养12 h，取1μL菌液进行PCR鉴定，反应体系与程序同上。选取阳性克隆菌株后送到生工生物工程（上海）股份有限公司测序。测序结果用DNAMAN软件和原序列比对验证。