《表1 引物名称及序列：小麦TaHPPR基因的克隆与表达分析》

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《小麦TaHPPR基因的克隆与表达分析》

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利用NCBI网站下载小麦基因Traes CS2B02G048000的序列。根据下载的序列设计引物Ta HPPR-F/Ta HPPR-R（表1），使用‘太原806’的c DNA作为模板进行PCR扩增。扩增体系50μL，包括2×Phanta Max Master Mix（Vazyme，南京）25μL、上下游引物(10μmol/L）各2μL、模板DNA（100 ng/L）2μL、dd H2O 19μL。扩增程序：95℃预变性3 min；95℃变性15 s，60℃退火15 s，72℃延伸1 min，35个循环；72℃延伸5 min，4℃保存。扩增产物为平末端，为了保证扩增产物的完整性，进行琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物的质量，目的片段经胶回收纯化，并克隆到p EASY?-Blunt Cloning Kit(Trans Gen，北京）载体上，加连接产物于Trans1-T1感受态细胞，涂板过夜，PCR鉴定阳性克隆，正确后每个样品选取3个独立克隆进行测序（北京六合华大基因公司）。