《表1 引物名称及序列:茄子紫外光受体蛋白基因SmUVR8的克隆及功能分析》

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《茄子紫外光受体蛋白基因SmUVR8的克隆及功能分析》


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提取‘蓝山禾线茄’子叶和拟南芥嫩叶RNA,取500 ng反转录成cDNA后稀释1 000倍。取2μL按照TaKaRa试剂盒SYBR.Premix Ex TaqTM(Tli RnaseH Plus)步骤进行荧光定量PCR反应。分别以茄子Actin和拟南芥Actin作为内参(Astell et al.,1981),设计特异引物SmAction-F/SmAction-R和AtAction-F/AtAction-R(表1)。利用Funglyn公司FTC-3000型荧光定量PCR仪进行反应:95℃30 s;95℃8 s,60℃34 s,40个循环,检测茄子的SmUVR8、SmHY5和SmCHS和拟南芥的At UVR8、AtHY5和AtCHS在UV-B处理和对照处理组的表达情况,3次技术重复。计算基因与Actin基因拷贝数的比值,采用2-??Ct法计算基因的相对表达量。采用SPSS 17.0统计软件进行皮尔逊相关系数(r值)计算。