《表1 所用引物的序列：欧洲花楸病程相关蛋白基因Sa PR1-like的克隆及序列分析》

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《欧洲花楸病程相关蛋白基因Sa PR1-like的克隆及序列分析》

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以harpin蛋白诱导欧洲花楸悬浮细胞不同时间样品的cDNA为模板，选取微管蛋白基因（Tubulin）作为内参基因，检测欧洲花楸悬浮细胞中SaPR1-like基因表达量的变化。设计SaPR1-like基因特异性引物为SaPR1-likeqPCR-F和SaPR1-like-qPCR-R，见表1。反应体系为cDNA 1μL，Premix Ex Taq酶5μL，引物SaPR1-likeqPCR-F 0.2μL，引物SaPR1-like-qPCR-R 0.2μL，参比染料ROX（Ⅱ）0.2μL，双蒸水3.4μL；PCR反应条件为95℃预变性30 s，95℃变性5 s，60℃退火34 s，40个循环，每个循环后采集荧光信号作溶解曲线。每个样品都进行3次生物学重复和3次技术重复。SaPR1-like基因的相对表达量值通过2-ΔΔCt公式计算得出。