《表1 引物序列：杜仲类钙调蛋白基因EuCML5的克隆及表达分析》

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《杜仲类钙调蛋白基因EuCML5的克隆及表达分析》

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使用RNA提取试剂盒（含DNA酶）提取样本杜仲总RNA，反转为cDNA后进行实时荧光定量分析。参考Ye等（2018）的报道，以杜仲EuACTIN作为内参基因。使用Primer Premier 5和Oligo7软件进行EuCML5引物设计（表1）。反应程序为：95℃预变性3 min；95℃变性10 s，60℃退火延伸30 s，共40个循环。每个样品设置3个机械重复，按照2-ΔΔCT计算和分析基因的表达水平。