《表1 引物序列及用途：甘蓝型油菜CIPK2与CIPK16基因的克隆、表达分析与互作CBL蛋白的鉴定》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《甘蓝型油菜CIPK2与CIPK16基因的克隆、表达分析与互作CBL蛋白的鉴定》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

Bna：油菜；CIPK：类钙调磷酸酶B互作蛋白激酶；UP1：未知蛋白1；UBC9：泛素共轭酶9；划线表示酶切位点；下同

以cDNA为模板，扩增基因片段，PCR反应体系为：10×Pfu缓冲液5μL，10 mmol/L dNTPs 1μL，20μmol/L正、反向引物1μL，cDNA模板1μL，Pfu DNA聚合酶（Bioer，杭州）0.2μL以及ddH2O40.8μL。PCR程序：94℃3 min；94℃30 s，50℃30 s，72℃1 min 30 s，共35个循环；72℃10 min。通过琼脂糖凝胶电泳分离扩增产物，DNA凝胶回收试剂盒（Bioer，杭州）回收扩增产物，回收基因片段克隆到pJET1.2载体（Fermentas，美国），热击法转化大肠杆菌（Escherichia coli）DH5α，提取质粒，引物合成与双向测序验证均由上海生工完成。实验所需引物见表1。