《表1 引物序列及用途：南方红豆杉MCT基因克隆、功能验证及组织表达特异性检测》

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《南方红豆杉MCT基因克隆、功能验证及组织表达特异性检测》

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按照植物RNA提取试剂盒说明分别提取南方红豆杉根、茎、老叶、嫩叶和绿色树皮的总RNA，使用HITACHI3010分光光度计检测其浓度，并用琼脂糖凝胶电泳检测其质量。将质量好的总RNA按FastQuant cDNA第一链合成试剂盒说明去除gDNA并反转录合成cDNA第一链。将cDNA用RNaseFree ddH2O稀释20倍后用作模板，按照SYBR Premix Ex Taq II (Perfect Real Time）试剂盒说明进行qRT-PCR检测。反应体系：2×SYBR Premix Ex Taq II 10.0μL，10μmol/L qTcMCT-F和qTcMCT-R引物（表1）各1.0μL，cDNA模板1.0μL，RNase Free H2O补足至20.0μL。扩增程序：95℃预变性30 s；95℃15 s，55℃15 s，68℃15 s，进行40个循环。以18S作为内参基因，采用2-??Ct计算基因的相对表达量。其中，每个样品重复3次，统计分析用t检验。