《表1 引物序列及用途:山药赤霉素受体基因DoGID1A的克隆及表达分析》
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《山药赤霉素受体基因DoGID1A的克隆及表达分析》
GID1:赤霉素受体基因;CHC:网格蛋白重链基因
参考NCBI GenBank中登录的冈比亚白山药(D.rotundata)转录组里4个赤霉素受体基因的序列(GenBank No.BQMI01000019.1,GenBank No.BBQW-I01003574.1,GenBank No.BDMK-01000697.1和GenBank No.BDML01002103.1),用Primer Premier 5.0软件设计引物(表1)。引物由北京擎科生物科技有限公司合成。PCR反应体系为25μL,其中模板c DNA和上、下游引物(10μmol/L)各0.5μL,Mix Taq酶12.5μL,ddH2O 11μL。反应条件为95℃预变性3 min;95℃变性30 s,50℃退火30 s,72℃延伸1 min,32个循环;72℃5 min。1.2%凝胶电泳检测目的条带,将PCR产物回收纯化后,链接于载体PMD18-T,转化大肠杆菌培养,挑选阳性菌斑抽提,酶切,双酶切检测之后,克隆成功的产物送昆明硕擎生物技术有限公司进行测序。
图表编号 | XD00109943800 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.11.25 |
作者 | 龙雯虹、孟金贵、徐升胜、张雪梅、段延碧、杨荣萍 |
绘制单位 | 云南农业大学园林园艺学院、云南农业大学园林园艺学院、云南农业大学园林园艺学院、云南农业大学农学与生物技术学院、云南农业大学农科教学实验中心、云南农业大学园林园艺学院 |
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