《表1 文中所用引物序列:玉米赤霉素受体基因ZmGID1a的克隆及功能研究》

《表1 文中所用引物序列:玉米赤霉素受体基因ZmGID1a的克隆及功能研究》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
本系列图表出处文件名:随高清版一同展现
《玉米赤霉素受体基因ZmGID1a的克隆及功能研究》


  1. 获取 高清版本忘记账户?点击这里登录
  1. 下载图表忘记账户?点击这里登录
注:下划线为酶切位点。Note:the bases with underline represent restriction enzyme cutting site.

利用玉米c DNA扩增GID1a的全长序列,并分别在扩增引物的5'端和3'端添加限制性内切酶位点BglⅡ和SpeⅠ,PCR扩增产物克隆到pMD19-T载体中扩繁后送上海英骏公司测序。测序结果正确的质粒利用BglⅡ和SpeⅠ进行双酶切,收集GID1a的全长,同时双酶切酵母载体pEG202,两者利用T4连接酶连接形成pEG202-GID1a质粒,选择测序正确的质粒用于后续实验。同理,利用玉米c DNA扩增DELLA8和DELLA9,分别在其引物的5’端和3’端添加Eco R I和HindⅢ两个限制性内切酶位点。PCR产物经公司测序正确后用Eco R I和HindⅢ进行双酶切,同时双酶切酵母载体p JG4-5,利用T4连接酶连接分别形成pJG4-5-DELLA8和p JG4-5-DELLA9两个质粒,选择测序正确的质粒进行后续的实验。参照Lawit等[11]的方法进行酵母双杂交。