《表1 研究所用引物序列：葡萄耐铝毒基因MATE的克隆与表达分析》

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《葡萄耐铝毒基因MATE的克隆与表达分析》

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参照TSE202[2x T5 Fast q PCR Mix（SYBR Green I），擎科]的说明书进行荧光定量PCR分析，以GAP-DH基因作为内参基因，对铝胁迫不同时期的葡萄叶片MATE基因表达量进行荧光定量，引物序列见表1。以合成的c DNA作为模板，按照2×T5 Fast q PCR Mix(SYBR Green I）试剂盒的说明书进行操作，反应体系为2×T5 Fast q PCR Mix(SYBR Green I）10μL、上下游引物各0.8μL、c DNA 1.0μL，加Nuclease-free Water至20μL。荧光定量PCR反应程序为：预变性95℃1 min；循环阶段95℃10 s，60℃5 s，72℃10 s，40个循环；熔解阶段95℃15 s，60℃1 min、95℃15 s、0.3℃/20 s。待反应结束后进行荧光值变化曲线和溶解曲线分析。