《表1 忽地笑α-葡萄糖苷酶2编码基因克隆及表达分析所采用的引物序列》

《表1 忽地笑α-葡萄糖苷酶2编码基因克隆及表达分析所采用的引物序列》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《忽地笑α-葡萄糖苷酶2编码基因的分子克隆与原核表达》


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注:带下划线的序列为与线性化质粒的同源臂,用于基因组装Note:The underlined sequences were the homologous arms to the linear vector for gene assembly via one step cloning

称取花期忽地笑的根、花柱、花葶、花苞、子房、花瓣和雄蕊及盛叶期忽地笑的叶片,液氮速冻后提取忽地笑不同组织的RNA,然后利用反转录酶获得忽地笑不同组织的c DNA;利用忽地笑内参基因TIP41[12]和α-葡萄糖苷酶候选基因CL6740的特异性引物(表1),以各组织c DNA为模板,进行实时定量PCR。PCR程序为95℃预变性5 min;95℃变性15 s,56℃退火15 s,72℃延伸20 s,共40个循环。每个样品均进行3次重复试验。利用2-ΔΔCt法计算忽地笑不同组织中α-葡萄糖苷酶候选基因的丰度。