《表1 基因克隆与表达分析所用引物》

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《中间锦鸡儿CiCesA3的克隆及表达分析》

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根据大豆Glycine max、杨树、棉花Gossypium raimondii以及中间锦鸡儿中其他已知的CesA基因序列，利用Primer premier5.0软件设计简并引物（表1），以cDNA第1条链为模板进行基因中间片段的克隆．多聚酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）体系：10×LA PCR BufferⅡ（+Mg2+)5μL，上游（CiCesA3-jb5'）和下游（CiCesA3-jb3'）引物各2μL（10μmol/L），dNTP Mixture（2.5mmol/L）8μL，模板1μL，LA Taq酶0.5μL，无菌水31.5μL．引物退火温度为58℃，PCR反应条件依照TaKaRa LA Taq?说明书（Cat#RR002B）设置．PCR反应中所用到的rTaq酶、PrimeSTAR高保真酶、LA Taq酶及Marker DL5000均购于TaKaRa.