《表1 Dl ZAT10基因克隆和超表达引物序列》

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《龙眼DlZAT10基因克隆与植物超表达载体构建》

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注：F为上游引物Forward primer，R为下游引物Reverse primer。

对研钵、研磨棒及称量勺进行充分消毒灭菌，取50～100 g新鲜样品叶片加液氮充分研磨，提取龙眼叶片中的总RNA，用紫外分光光度计检测所提RNA的浓度和纯度，记录OD260/280、OD260/230的比值和浓度，用琼脂糖凝胶电泳检测其完整性。利用反转录试剂盒合成c DNA，检测正确后?80℃保存备用。利用Primer Premier 5.0软件根据前期得到的龙眼转录组Dl ZAT10基因序列全长设计该基因的上下游引物（表1 c-Dl ZAT10），长度一般为20～25 bp，选择无发卡结构、无引物二聚体结构、无错配的引物，得到引物后以c DNA为模板通过巢式PCR技术扩增目的基因全长。