《表1 克隆引物序列：芒果MinSPS1基因的克隆及表达载体的构建》

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《芒果MinSPS1基因的克隆及表达载体的构建》

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根据前期已经拼接得到的该基因的全长序列，利用Primer Premier 5.0软件在CDS区设计上下游特异性引物扩增MinSPS1基因。PCR反应体系:1μL cDNA模板，上下游引物（10 pmol/μL）各0.5μL、10μL TaKaRa PrimeSTAR MaxDNA聚合酶和8μL ddH2O；PCR反应程序:98℃预变性5 s；98℃10 s，57℃15 s，72℃1 min，35个循环；72℃延伸10 min。连接pEASY-blunt载体，转化到Trans-T1大肠杆菌感受态细胞中，挑取阳性菌液送公司测序（表1）。