《表1 紫玉兰MlSOC1基因克隆、表达分析及载体构建相关引物》

《表1 紫玉兰MlSOC1基因克隆、表达分析及载体构建相关引物》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《紫玉兰MlSOC1基因亚细胞定位及花芽分化时期的表达分析》


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紫玉兰花芽的总RNA用纯植物RNA提取试剂盒[购自天根生化科技(北京)有限公司]进行提取,并用核酸分析仪对提取的总RNA质量进行检测。以提取质量合格的RNA作为模板,利用反转录试剂盒(Prime ScriptTMRT Master Mix)[购自宝生物工程(大连)有限公司]反转录成cDNA的第1链[19]。用Primer 5.0软件设计引物,并将引物序列(表1)送至生工生物工程(上海)有限公司进行合成,通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)对MlSOC1-1和MlSOC1-2进行克隆。将PCR产物进行1%琼脂糖凝胶电泳检测。目的条带采用MiniBEST琼脂糖凝胶DNA提取试剂盒(日本TaKaRa公司)进行切胶回收、利用后,连接到pMD18-T载体上并转化大肠埃希菌DH5α。然后经过氨苄青霉素(ampicillin)抗性筛选,将阳性克隆菌液经PCR检测后送至生工生物工程(上海)有限公司进行测序。