《表1 基因克隆及载体构建引物信息》

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《水稻OsWHY1基因克隆及过表达与RNAi载体构建》


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下划线为酶切位点

用SacⅠ与SpeⅠ双酶切正义链载体与PTCK303表达载体,回收片段后用T4连接酶连接,转化大肠杆菌DH5α,抽提质粒后用RS引物(表1)进行PCR验证.用KpnⅠ与Bam HⅠ双酶切反义链载体与连接有正义链的PTCK303表达载体,回收片段后用T4连接酶连接,转化大肠杆菌DH5α,抽提质粒后用RAS引物(表1)进行PCR验证与SacⅠ与Bam HⅠ双酶切验证.利用冻融法转化农杆菌EHA105,并进行菌落PCR鉴定,阳性菌液加入50%甘油于-80℃保存.