《表1 引物列表：文心兰NPR1基因的克隆与诱导抗性过程中的表达分析》

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《文心兰NPR1基因的克隆与诱导抗性过程中的表达分析》

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利用pfam(pfam.xfam.org）下载NPR1/NIM1 like defence protein C terminal种子文件（PF12313），于转录组数据（PRJNA428913）进行隐马克夫模型（Hidden Markov models，HMMs）搜索，并利用所得到片段进行RACE扩增全长，设计开放阅读框（Open reading frame，ORF）的引物进行全长验证，所用引物见表1。RACE及ORF扩增使用2×Taq PCR Mastermix（天根，KT201），参照说明书及引物温度进行PCR反应，阳性条带回收TA克隆后转化大肠杆菌，送博尚基因测序。利用DNAMAN 6.0进行蛋白序列预测，NCBI BLAST(https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi）进行核酸及蛋白序列比对。利用NCBI CD-search(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/Structure/cdd/wrpsb.cgi）进行保守结构域分析。利用SignalP(http://www.cbs.dtu.dk/services/SignalP/）进行信号肽分析。利用PSORT(https://psort.hgc.jp/）进行亚细胞定位预测。