《表1 基因克隆引物:茶树CsAAPs亚家族基因的克隆与表达分析》

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《茶树CsAAPs亚家族基因的克隆与表达分析》


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在课题组前期研究的基础上,以基因名称“amino acid permease”进行搜索、FPKM(Fragments per Kilobase million)值(>5)以及序列长度等为参考条件,筛选得到茶树AAPs亚家族基因序列14条,将具有包含最长CDS区域的基因序列利用软件Primer premier 5进行PCR扩增引物设计,如表1所示,克隆得到基因序列,随后连接PMD-18T载体(TAKARA)并转化大肠杆菌,挑取阳性克隆送生工生物工程(上海)股份有限公司进行测序。将测序正确的序列与Wei等[31]发布的CSS(Camellia sinensis var.sinensis)基因组序列进行比对验证,该基因组是对杂合度较低的茶树品种舒茶早进行测序得到的。