《表1 设计的引物：茶树细胞色素P450基因CYP710A1的克隆及差异表达特征分析》

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《茶树细胞色素P450基因CYP710A1的克隆及差异表达特征分析》

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注:表中的F为基因的正向引物，R为基因的反向引物，inner为基因的内引物，outer为基因的外引物。

试验茶样取自于长势良好、叶片生长均匀的铁观音茶园，并于新梢的芽头、一芽1～5叶共6个叶外分别取样，置于-80℃冰箱中保存备用。参照步骤1.2，将所取样品反转录成cDNA模板，用于检测茶树CYP710A1基因在不同叶片中的表达含量。根据已获得的茶树CYP710A1基因全长，采用Primer 5.0软件设计一对特异性的荧光定量引物710A1-F4/R4（表1）及一对荧光定量引物GAPDH-F1/R1（表1），参照荧光定量试剂盒的操作步骤，配制每样20μL的总反应体系:正反引物各1.0μL；样品cDNA 1.0μL；SYBR Green10.0μL；最后补ddH2O 7.0μL。qRT-PCR反应程序为:95℃总变性30s；95℃预变性5s，60℃退火30s，72℃延伸30s，共33个循环；最后，采用比较CT的计算方法（2-ΔΔCT）计算茶树CYP710A1基因在不同叶片中的表达含量。