《表1 目的基因引物信息:小鼠CYP2J5基因组织差异表达及蛋白质结构与功能分析》

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《小鼠CYP2J5基因组织差异表达及蛋白质结构与功能分析》


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分别取3只90 d小鼠肺、心、肝、肾、皮肤、肌肉、小肠和睾丸8种组织,采用Trizol法提取雄性小鼠肾脏组织总RNA,核酸/蛋白浓度测定仪检测其浓度。以总RNA为模板,Oligo(dT)为引物(表1),按照PrimeScript(Ta KaRa)反转录试剂盒说明,反转录获得相应c DNA。以鼠β-actin作为内参基因,采用实时荧光定量PCR检测小鼠不同组织中CYP2J5基因的mRNA表达水平,每种组织设置3个重复。扩增体系:SYBRⅡ(Ta KaRa)5μL,Primer F/R 0.8μL,c DNA 1μL,H2O 2.4μL。反应程序:95℃预变性10 min;95℃变性15 s;60℃退火1 min。溶解曲线收集信号的程序:95℃预变性15 s;60℃变性1 min;95℃退火15 s。