《表1 引物序列信息:齐卡兔瘦蛋白基因在不同组织中的表达水平与肉质指标的关联性》

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《齐卡兔瘦蛋白基因在不同组织中的表达水平与肉质指标的关联性》


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用生工生物工程(上海)股份有限公司生产的反转录试剂盒(PrimeScrip RT reagent kit)把总RNA合成cDNA第一链,然后用以上cDNA为模板,用荧光定量试剂盒SYBR?Prime ScriptTMⅡ[生工生物工程(上海)股份有限公司]进行荧光定量分析,总反应体系为10μL,其中:cDNA模板1μL,SYBR?Prime Ex TapTMⅡ5μL,上、下游引物各0.4μL,无RNase d H2O 3.2μL。反应条件:95℃预变性30 s;95℃变性10 s,61.4℃退火30 s;熔解曲线温度从65℃上升到95℃,升温速率为0.5℃/s,39个循环。对所有的样本重复测定3次并在每次实验时设立对照组,根据GenBank数据库中家兔基因leptin和β-actin的编码区序列(coding sequences,CDs),用Primer Premier 5.0设计荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time fluorescence polymerase chain reaction,qRT-PCR)引物,并由生工生物工程(上海)股份有限公司合成;引物序列信息见表1。