《表1 基因克隆引物:茶树CsLHTs亚家族基因的克隆与表达分析》

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《茶树CsLHTs亚家族基因的克隆与表达分析》


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按照TIANGEN的多糖多酚植物总RNA提取试剂盒说明书进行茶树总RNA的提取,使用TAKARA的RNA反转录试剂盒完成cDNA第一链合成。根据茶树转录组数据,筛选得到茶树LHTs亚家族基因序列5条,并将其与茶树基因组序列[10]进行比对。利用软件Primer premier 5在序列ORF两端设计扩增引物(表1),进行RT-PCR扩增。PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳鉴定后,将PCR纯化产物连接到PMD-18T载体(TAKARA)并转化大肠杆菌,挑取阳性单克隆送上海生工进行测序。