《表1 试验材料化学成分：花鲈b2m基因cDNA的克隆及表达分析》

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《花鲈b2m基因cDNA的克隆及表达分析》

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根据大黄鱼、黄金鲈（Perca flavescens）、齿舌鲈b2m基因序列（GenBank登录号分别为LOC104938519、LOC114550153和FN667961.1）设计引物（表1），扩增目的基因的中间片段。PCR反应体系为：Premix Taq（TaKaRa，日本）10μL，正反向引物（10μmol·L-1）各1μL，cDNA模板1μL，用ddH2O补足至20μL。PCR反应程序为：94℃3 min；94℃30 s、60℃30 s、72℃2 min，30个循环；72℃10 min。参考吴平等[23]的方法，采用降落PCR和巢式PCR扩增cDNA的5'和3'末端。利用胶回收试剂盒（Omega）回收目的片段，连接pMD19-T载体（TaKaRa），转化DH5α，筛选阳性克隆送金唯智生物技术有限公司（苏州）测序。