《表1 引物序列信息：一例猪流行性腹泻病毒与葡萄球菌混合感染的病原学诊断》

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《一例猪流行性腹泻病毒与葡萄球菌混合感染的病原学诊断》

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分别根据GenBank中PEDV M基因（GenBankID:LY490763.1）、TGEV S基因（GenBankID:DI107744.1）、PoRV VP7基因（GenBankID:JQ343835.1）的保守序列各设计1对特异性引物，送上海英潍捷基公司合成，引物序列信息见表1。采集送检仔猪肠道内容物，按PEDV RNA提取试剂盒、TGEV RNA提取试剂盒、PoRV RNA提取试剂盒说明书分别提取3种病毒RNA。以提取的病毒RNA为模板，按Hi Fi Script cDNA Synthesis Kit试剂盒说明书进行RNA反转录，分别合成上述3种病毒基因cDNA。以3种cDNA作为模板，分别进行RT-PCR扩增。总反应体系25μL:2×Taq Mix 12.5μL，上、下游引物（10μmol/L）各1.0μL，cDNA模板2μL，RNase Free H2O 8.5μL。反应条件见表2。最后1.2%琼脂糖凝胶电泳观察结果。