《表3 引物序列：海洋链霉菌来源的脂肪酶OUC-Sb-lip2的异源克隆表达及其富集DHA的应用》

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《海洋链霉菌来源的脂肪酶OUC-Sb-lip2的异源克隆表达及其富集DHA的应用》

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根据脂肪酶基因序列以及pP43NMK质粒载体基因序列，使用SnapGene 5.0.5及DNAMAN 8.0软件设计的引物序列如表3所示。以脂肪酶OUC-Sblip2的基因片段作为模板，使用无缝拼接技术构建重组质粒pP43NMK-OUC-Sb-lip2。测序正确后，将提取的重组质粒导入WB800宿主细胞，阳性克隆验证结果正确后，接种于低盐LB培养基（50μg/m L，Kana），20℃，220 r/min低温培养24 h，诱导重组菌株WB800/OUC-Sb-lip2表达目的蛋白并分别收集发酵液上清和沉淀。最后使用SDS-PAGE分别检测上清液和细胞沉淀破碎液中目的蛋白是否正确表达。