《表2 引物序列信息：重叠延伸PCR-酶切连接法构建链霉菌表达载体》

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《重叠延伸PCR-酶切连接法构建链霉菌表达载体》

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在GenBank中查找限速酶基因eryK和eryG序列以及启动子permE基因序列，并结合pSET152载体序列利用引物设计软件Primer premier 5.0设计试验所用的所用引物，送至生工生物工程（上海）股份有限公司合成序列，试验中各引物序列详见表2，并根据相应的引物对，以出发菌株基因组DNA为模板，进行PCR扩增获得permE、eryK (1）、eryK (2）和eryG基因片段，其PCR反应体系及常用反应程序（20μL反应体系）为：1L模板DNA，10μL2×Trans TaqH Fi PCR Super Mix，正反向PCR引物（10μmol·L-1）各0.4～0.8μL，双蒸水补至20μL。