《表1 重叠延伸PCR引物序列》

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《T7 RNA聚合酶基因表达系统在鱼腥藻7120中构建及hG-CSF的表达》

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Tac-T7 RNAP-Cm R通过重叠PCR获得[15]。分别以p GEX质粒、BL21（DE3）基因组DNA、p HSG398质粒为模板，扩增Tac启动子基因、T7RNA聚合酶基因以及氯霉素抗性基因（引物见表1），其中T7 RNA聚合酶基因首先通过一次引物重叠延伸PCR在C端添加6×His tag序列，将上述片段等量加入作为模板，通过重叠延伸PCR扩增出Tac-T7 RNAP-Cm R片段，经TA克隆，获得p EASY-T1-Tac-T7 RNAP-Cm R载体。