《表1 PCR扩增引物序列》

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《水通道蛋白4基因多态性与陕西地区高血压脑出血患者迟发性脑水肿的相关性研究》


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(1) 基因组DNA提取:采集清晨空腹时外周静脉血,DNA提取试剂盒(天根生化科技有限公司,北京)提取全血基因组DNA。(2)PCR扩增:上、下游引物各1μL(见表1,均由上海生工生物技术有限公司合成),d NTP混合物2μL,TaqDNA聚合酶0.25μL,模板DNA1μL,10×Buffer 2.5μL。反应条件:95℃预变性4 min,然后按照变性95℃20 s、退火60℃30 s、延伸72℃50 s的顺序循环30周期,最后72℃延伸3 min。(3)测序:PCR产物采用美国ABI公司配套专用BigDye®;Terminator v3.1 Kit试剂盒进行线性扩增,最后采用ABI 3730测序仪进行测序。