《表1 PCR扩增引物序列》

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《兔心包液CD44和波形蛋白阳性细胞具有多项分化潜能》

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将第3代细胞接种于6孔板中，待细胞贴壁汇合为80%～90%后，收集心包液细胞，Trizol法提取总RNA，反转录反应参照Thermo Fisher RNA PCR试剂盒反转录合成cDNA，使用Bioconnect Services公司（BCS）2×Taq Blue Master MIX试剂盒行PCR扩增。PCR反应条件:94℃预变性5 min，94℃变性30 s，退火30 s，72℃延伸60 s，30～35循环，72℃充分延伸5 min。使用1%琼脂糖凝胶电泳30～35 min后，凝胶成像系统检测摄片。GAPDH为内参。Real-time PCR反应使用BCSWiz Universal SYBR Green Real-time PCR Master Mix进行扩增。Real-time PCR条件:95℃预变性2min，95℃变性10 s，60℃退火+延伸1 min，40循环，溶解曲线:95℃15 s，60℃1 min，95℃15 s。上海生工生物工程有限公司参与引物设计及合成。引物序列见表1。