《表1 PCR扩增引物序列》

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《2015—2017年广西鸡源沙门氏菌耐药性与致病性的相关性分析》

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参照GenBank已发表的耐药基因序列和相关文献（Nde and Logue，2008；廖成水等，2011；Lu et al.，2011；刘芳萍等，2013），设计16对特异性引物（表1）用于扩增β-内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、磺胺类和氟喹诺酮类共16种代表性耐药基因。挑取沙门氏菌分离株纯化培养的单菌落，在LB培养液中37℃培养12 h，提取细菌总DNA。PCR反应体系20.0μL:Premix TaqTM10.0μL，25 pmol/μL的上、下游引物各0.5μL，DNA模板2.0μL，灭菌双蒸水7.0μL。扩增程序：94℃预变性5 min；94℃30 s，52～57℃30 s，72℃45 s，进行35个循环；72℃延伸10 min。PCR扩增产物经1.0%琼脂糖凝胶电泳后，采用凝胶成像系统观察拍照。