《表1 PCR扩增引物序列》

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《贵州不同地区番茄红酸理化、风味和细菌群落比较分析》

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参照E.Z.N.A.Soil DNA Kit（Omega Bio-tek，Norcross，GA，U.S．）说明书对样品进行DNA抽提，使用1%的琼脂糖凝胶电泳检测DNA的提取质量，使用NanoDrop 2000测定DNA浓度和纯度；使用2轮引物对16SrRNA基因V5～V7可变区进行PCR扩增，引物序列见表1。扩增程序：95℃预变性3min，15个循环（95℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸45s），然后在72℃稳定延伸10min，最后在4℃进行保存（PCR仪：ABI GeneAmp 9700型）。PCR反应体系：5×TransStart FastPfu缓冲液4μL，2.5mmol/L dNTPs2μL，上游引物（5μmol/L）0.8μL，下游引物（5μmol/L)0.8μL，TransStart FastPfu DNA聚合酶0.4μL，模板DNA 10ng。