《表1 PCR扩增引物序列》

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《热疗对人胃癌细胞HSP70和CXCL13、CXCR5的影响及其生物学意义》


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将胃癌细胞按照2~3×104/mL的密度接种到6孔板中,置于培养箱中过夜贴壁。然后按照分组分别置于37℃、41℃和42℃水浴锅中各培养1h后,用TRIzol提取总RNA,用逆转录试剂盒合成cDNA。GAPDH为内参照,反应体系为20μL,PCR反应条件为95℃预变性1min、95℃变性15s、60℃退火30s、72℃延伸30s,共40个循环。用实时荧光定量PCR仪(美国ABI PRISM7500)对PCR产物进行实时定量分析。引物序列及片段长度见表1。