《表1 PCR/qRT-PCR引物序列》

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《长期继代培养的转基因苹果外源基因遗传及表达稳定性分析》

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根据GFP基因序列设计荧光定量特异引物GFP-F/GFP-R（表1），扩增长度为116bp。内参基因为苹果Actin-7基因，内参基因引物为ActinFn/Actin-Rn（表1），扩增长度为151bp。GFP基因的相对荧光定量分析，按照ABI公司的SybrGreen PCR Master Mix试剂盒说明进行扩增。荧光定量PCR反应在Roche公司的LightCycler480Software Setup型荧光定量PCR仪上进行，反应程序是95℃预热3min；随后95℃15s，60℃40s，进行40个循环，然后4℃保存。根据2-ΔΔCT法[26]计算GFP基因在mRNA水平上的相对表达量。