《表1 本试验所用引物：谷子NADP-ME的鉴定及其对逆境胁迫的响应》

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《谷子NADP-ME的鉴定及其对逆境胁迫的响应》

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所用引物由Primer Primer 5.0设计，引物信息见表1。样品c DNA均一化后作为实时荧光定量PCR模板，以谷子β-actin（Seita.7G294000）作为内参基因。反应体系为10μL 2×荧光染料混合液（BBI，Shanghai，China）、0.4μL正向引物（10μmol·L–1）、0.4μL反向引物（10μmol·L–1）、2μL cDNA模板和7.2μL无菌水。经预试验优化后，PCR反应程序为95℃3 min；95℃7 s，57℃10 s，72℃15 s，45个循环。试验设计3次重复，采用相对定量2–ΔΔCt方法计算基因在某种逆境处理下某个时间点相对于对照的转录水平变化[28]。每个处理3次重复。采用2-ΔΔCt法计算相对表达量，采用SPSS19.0软件对数据进行统计分析。苗期不同逆境下表达分析结果利用百迈克云平台在线工具（https://international.biocloud.net/zh/software/tools/det ail/small/305）聚类热图绘制（Pretty Heatmaps）进行热图绘制，参数默认。