《表1.本试验所用引物:家蚕CVDAR品系对BmNPV的抗性特征分析》
测的浓度的RNA进行合成cDNA,步骤如下:稀释RNA浓度到1000 ng/μL;样品1μL,ddH2O6μL,1μL试剂I,2μL试剂II,42°C热激2 min;加入1μL试剂3,4μL试剂4,4μL试剂5,1μL ddH2O,根据37°C 30 min、85°C 5 s、12°C保持体系合成cDNA。而合成的cDNA模板的检测是以家蚕肌动蛋白基因actin3为内参基因,引物序列见表1。反应体系(15μL)如下:1.5μL 10×r Taq buffer(含Mg2+),1.5μL dNTPs,0.6μL r Taq酶,1μL cDNA模板,0.3μL Actin3-F/R,双蒸水加至15μL。反应程序:94°C 4 min;94°C 40 s,58°C45 s,72°C 30 s,30个循环;72°C 10 min,12°C保持。反转出来的cDNA吸出5–10μL进行琼脂糖凝胶电泳检测。
图表编号 | XD00125551300 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.12.04 |
作者 | 秦琪、董战旗、雷雪蛟、曹明亚、唐亮、石美宁、潘敏慧 |
绘制单位 | 西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室、西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室、西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室、西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室、广西壮族自治区蚕业技术推广总站、广西壮族自治区蚕业技术推广总站、西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室 |
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