《表2 试验所用引物:辣椒金属伴侣蛋白基因CaHPP7提高植物对铜和热胁迫的抗性》

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《辣椒金属伴侣蛋白基因CaHPP7提高植物对铜和热胁迫的抗性》


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利用Ca HPP7-2307-F/-R引物对(表2)从R9的叶片c DNA中扩增Ca HPP7基因编码区全长,参照Wang等(2019)的方法构建Ca HPP7的过表达载体p VBG2307-Ca HPP7,并利用蘸花法(Clough and Bent,1998)转化拟南芥Col-0,空载体p VBG2307为对照,T3代纯合转基因种子用于非生物胁迫处理。对于热胁迫处理,将5 d苗龄的拟南芥Ca HPP7过表达株系(OE1,OE13)、转空载体株系(EV)和野生型(WT)幼苗进行46℃高温处理50 min,再于22℃条件下恢复5 d,然后统计幼苗存活率。从24 d苗龄的拟南芥植株上打取1.0 cm叶圆片放入清水中,42℃处理24 h,22℃处理为对照(Zhai et al.,2017)。处理结束后测定拟南芥叶圆片的叶绿素含量,试验设置3次重复,每个重复随机选取8个叶圆片。