《表1 特异性引物：谷子SiPRR37基因对光温、非生物胁迫的响应特点及其有利等位变异鉴定》

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《谷子SiPRR37基因对光温、非生物胁迫的响应特点及其有利等位变异鉴定》

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首先通过检索NCBI数据库获得1条注释为PRR37基因的谷子m RNA序列（XM＿022824614），将该基因命名为Si PRR37，以此序列为模板设计3对特异引物用于基因扩增（表1）。将延谷11号饱满种子种植于口径为10 cm×10 cm装有营养土的塑料盆中，在自然条件下生长至五叶期时采集顶叶，液氮速冻，然后用Ultrapure RNA Kit（康为世纪生物科技有限公司)提取总RNA，用Prime Script II 1st Strand c DNA Synthesis Kit （宝日医生物技术(北京）有限公司)反转录合成第一链c DNA，用3对特异性引物分段扩增目的基因，扩增体系包括稀释10倍的c DNA模板1μL、2×Es Taq Master Mix （Dye）（康为世纪生物科技有限公司）10μL、10μmol L-1正、反向引物各0.5μL，最后用dd H2O补足到20μL。PCR扩增程序为94℃预变性5 min；94℃变性30 s、58℃退火30 s、72℃延伸90 s，35个循环；72℃延伸5 min。用Easy Pure Quick Gel Extraction Kit (北京全式金生物技术有限公司）纯化回收PCR产物，然后连接到p BM16A克隆载体（北京艾德莱生物科技有限公司），再转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，挑选阳性克隆菌液送生工生物工程（上海）股份有限公司测序。