《表1 引物序列:茶树7个褪黑素合成酶基因的鉴定及非生物胁迫响应》
根据前期转录组数据的注释结果[19]及茶树基因组数据库的基因注释结果[20],筛选茶树TDC、T5H、SNAT和ASMT基因序列,序列经拼接后在进行Blastx同源比对,并结合DNAMAN软件查找开放阅读框(ORF).在ORF上下游设计引物(表1),以1.2所述cDNA为模板,按照PrimeSTAR HS试剂盒操作步骤进行PCR扩增,程序为98℃5 min;98℃10 s,56℃10 s,72℃3 min,30个循环后72℃延伸5 min.PCR产物经1.0%琼脂糖凝胶电泳,用凝胶成像系统(Bio-Rad)检测和记录结果.扩增产物回收,转化进入大肠杆菌,筛选阳性克隆进行基因测序,测序结果通过NCBI数据库比对,最终确定获得的基因的完整编码序列.
图表编号 | XD00228199000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.10.25 |
作者 | 曹红利、陆鲸冰、吴英杰、岳川 |
绘制单位 | 福建农林大学园艺学院、茶学福建省高校重点实验室、福建农林大学园艺学院、茶学福建省高校重点实验室、福建农林大学园艺学院、茶学福建省高校重点实验室、福建农林大学园艺学院、茶学福建省高校重点实验室 |
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