《表1 基因引物：褪黑素对小鼠睾丸间质细胞凋亡的影响》

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《褪黑素对小鼠睾丸间质细胞凋亡的影响》

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使用RNAiso Plus（TaKaRa，9109）进行RNA提取，根据TaKaRa反转录试剂盒要求，将RNA反转录为cDNA。本实验所用基因引物由上海生工生物技术有限公司设计及合成，引物序列见表1。利用荧光定量PCR仪检测对照组和不同浓度褪黑素处理组凋亡相关基因及增殖相关基因表达。20μL反应体系:SYBR Premix Ex TaqⅡ10μL、上游引物0.4μL（0.2μmol/L）、下游引物0.4μL（0.2μmol/L）、ROX reference DyeⅡ0.4μL、c DNA 2μL，dd H2O补足至20μL。反应条件:95℃预变性30 s；95℃变性5 s，59℃退火34 s，扩增40个循环，95℃复性15 s。运用2-△△Ct方法进行数据分析。