《表2 基因引物合成信息:BMAL1对小鼠睾丸间质细胞凋亡的影响》
采用RNAiso Plus(TaKaRa)提取小鼠睾丸间质细胞的总RNA,并反转录为cDNA,用于qRT-PCR实验,根据TaKaRa的反转录试剂盒要求,利用RNA的浓度值计算反转录20μL cDNA所需的RNA量。本实验所需的基因引物序列见表2。引物由上海生工生物技术有限公司设计及合成,并利用PCR仪进行引物验证,摸索引物的最适反应条件。利用荧光定量PCR仪对BMAL1 siRNA组和BMAL1 siRNA NC组进行相关基因的分析。反应体系:SYBR Premix Ex TaqⅡ10μL、Forward primer 0.8μL(0.4μmol/L)、Reverse primer 0.8μL(0.4μmol/L)、ROX reference DyeⅡ0.4μL、cDNA 2μL、ddH2O至20μL。反应条件:95℃预变性30 s;95℃变性5 s,40个循环;56(59)℃退火34 s,扩增40个循环。运用2-△△Ct方法进行数据分析。
图表编号 | XD0098516400 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.06.10 |
作者 | 丁赫、郭乐薇、徐高青、王军、吕文发 |
绘制单位 | 吉林农业大学动物科技学院吉林省反刍动物繁育生物技术与健康养殖工程实验室、吉林农业大学动物科技学院吉林省反刍动物繁育生物技术与健康养殖工程实验室、吉林农业大学动物科技学院吉林省反刍动物繁育生物技术与健康养殖工程实验室、吉林农业大学动物科技学院吉林省反刍动物繁育生物技术与健康养殖工程实验室、吉林农业大学动物科技学院吉林省反刍动物繁育生物技术与健康养殖工程实验室 |
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