《表1 BMAL1 siRNA序列》

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《BMAL1对小鼠睾丸间质细胞凋亡的影响》

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根据说明书操作，将离心管3 000 r/min离心1 min，取125μL DEPC水加入到离心管中，配制成20μmol/L溶液。将小鼠睾丸间质细胞（武汉普诺赛生命科技有限公司，CL-0234）传代至6孔板中，1×105个/孔，37℃5%CO2培养箱中培养细胞24 h，待细胞完全贴壁，细胞生长到80%～90%时开始转染。10μL LipofectamineTM2000加入到250μL普通培养液中，轻轻混匀，室温孵育5 min；9μL BMAL1siRNA和BMAL1 siRNA NC（Negative Control），siRNA序列见表1，分别加入到250μL的普通培养液中，轻轻混匀，室温孵育5 min。将前两步的预混液混合，室温孵育20 min。弃去细胞培养液，使用无双抗的PBS清洗2～3次，添加1.5 mL无血清、无双抗的普通细胞培养液，同时将孵育好的混合液分别添加至6孔板的细胞培养液中，轻轻混匀，放到37℃5%CO2培养箱中继续培养。6孔板中细胞培养6 h后，添加200μL血清至培养液中，继续培养18～42 h，提取RNA和蛋白，进行检测。