《表1 siRNA序列表》
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《MAGE-A 3基因对宫颈癌细胞增殖及侵袭的影响及其机制探讨》
人宫颈癌HeLa和Siha细胞购自协和医科大学基础医学细胞中心。RPMI 1640培养液、胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)和Opti-MEM培养液购自美国Gibco公司。MAGE-A3过表达慢病毒(LV-MAGE-A3)[携带有MAGE-A3基因蛋白编码序列(coding sequence,CDS)的慢病毒载体]、对照空载体病毒(LV negative control,LV-NC)以及聚凝胺(polybrene)购自上海吉玛基因有限公司。靶向MAGE-A3基因的siRNA(siRNA-MAGE-A3-1、siRNA-M AG E-A 3-2和s i R N A-M AG E-A 3-3)和siRNA-阴性对照(siRNA-negative control,siRNA-NC)购自广州锐博生物科技有限公司(siRNA序列见表1)。脂质体LipofectAMINE3000购自美国Invitrogen公司。嘌呤霉素(puromycin)购自北京庄萌生物基因科技有限公司,RIPA蛋白裂解液、BCA蛋白定量试剂盒、SDS-PAGE凝胶配制试剂盒购自上海碧云天生物有限公司。PVDF膜购自美国Millipore公司,TRIzol试剂购自日本TaKaRa公司,反转录试剂盒(Fast Quant RT Kit)、实时荧光定量PCR试剂盒(Talent qPCR PreMix kit)购自北京天根生物有限公司。PCR引物由美国Invitrogen公司设计并合成。鼠抗人MAGE-A3单克隆抗体购自美国Abcam公司,兔抗人E-钙黏蛋白(E-cadherin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)单克隆抗体购自美国GeneTEX公司,兔抗人波形蛋白(vimentin)单克隆抗体购自美国Arigobio公司,兔抗人蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称AKT)单克隆抗体、兔抗人磷酸化AKT(phospho-AKT,p-AKT)单克隆抗体购自美国Cell Singaling公司,鼠抗人GAPDH单克隆抗体购自美国ABclonal公司,辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG和羊抗鼠IgG购自美国KPL公司。CCK-8试剂盒购自北京庄萌生物基因科技有限公司,Transwell小室和基质胶(matrigel)购自美国Corning公司。
图表编号 | XD00144217900 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.03.25 |
作者 | 李青、马英、何海鹏、石若冰、王琰、张惠、梁义娟、畅惠、高新萍 |
绘制单位 | 河北大学附属医院妇产科、河北大学附属医院妇产科、河北大学附属医院妇产科、河北大学附属医院妇产科、河北大学附属医院妇产科、河北大学附属医院妇产科、河北大学附属医院妇产科、深圳市萨米医疗中心妇产科、深圳市萨米医疗中心妇产科 |
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