《表1 siRNA及引物序列》

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《基于茎环法的RT-qPCR检测哺乳动物抗病毒siRNA的表达》

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注：Seq:sequence；SLP:stem-loop primer；FP:forward primer；BP:backward primer.24～45、2841～2862、2773～2794、133～154、3149～3170、2765～2786、2807～2828和111～132为NoVΔB2源siRNAs；16768和3280为PR8ΔNS1源siRNAs；miR-191-3p和miR-103a-3p为鼠源小RNAs，β-Actin为

恰当的标准化方法是基因表达定量分析的关键.本研究参考相关文献确定3个候选内参基因:β-actin，miR-191-3p和miR-103a-3p.其中β-actin是常用内参基因，线性引物扩增产物约200bp.Peltier等发现miR-191-3p和miR-103a-3p在13种正常组织和5对不同的肿瘤/正常邻近组织中的表达高度一致，在统计学上优于常用的参考基因[30]，因此作为候选参考基因之一.miR-191-3p和miR-103a-3p仅22bp，因此设计茎环状引物以便于反转录及后续扩增，引物序列见表1.