《表1 引物与siRNA信息》

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《香鱼IGF-1基因特性及其对单核巨噬细胞的功能调控》


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利用qRT-PCR检测香鱼IGF-1基因表达水平。总RNA抽提、第一链cDNA合成及qRT-PCR检测参照本实验室前期研究方法(Lu et al.,2017)。所用引物见表1,以香鱼18S rRNA作为内参基因。qRT-PCR使用StepOneTM实时PCR系统(Applied Biosystems,美国),每个样品重复5次。PCR反应体系为:SYBR Premix Ex Taq(2×)缓冲液12.5μL,cDNA模板0.5μL,引物(10μmol/L)各1μL,以ddH2O补足至25μL。反应程序为:94℃预变性300 s;95℃30s,60℃30 s,72℃30 s,40个循环。q RT-PCR检测结果使用2-ΔΔCt方法分析。