《表1 基因克隆与qRT-PCR引物信息》

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《猕猴桃Cu/ZnSOD的克隆及其在果实贮藏中的表达分析》

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利用‘红阳’猕猴桃（Actinidia chinensis var.chinensis‘Hongyang’）基因组数据库[24-25]获得猕猴桃候选铜锌超氧化物歧化酶基因序列。采用DNAMAN软件设计引物进行RT-PCR克隆验证，引物信息见表1。PCR反应体系为：Dream Taq Green PCR Master Mix（2×）25μL、10μmol的上下游引物各2μL、模板2μL、补足无菌双蒸水至50μL。PCR扩增程序为：94℃预变性4 min；94℃变性30 s，57/59℃退火30 s，72℃延伸30 s，循环35次；72℃延伸10min。PCR扩增产物经1.0%琼脂糖凝胶电泳分析，符合预期大小的片段采用EasyPure?Quick Gel Extraction Kit (TransGen，Beijing）试剂盒进行回收纯化，并连接到pEASY-T1 (TransGen，Beijing）克隆载体上，最后挑选阳性克隆子送北京六合华大基因科技有限公司测序。