《表1 试验所用引物信息：‘琯溪蜜柚’CmPAL基因的克隆与表达》

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《‘琯溪蜜柚’CmPAL基因的克隆与表达》

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以‘琯溪蜜柚’cDNA为模板进行PCR扩增，PCR反应体系与扩增程序设定均参照TransTaq?DNA Polymerase High Fidelity试剂盒（全式金）说明书，PCR反应体系（25μL):TransTaq?HiFi BufferⅡ（10×）（全式金）2.5μL，2.5mmol/L dNTPs（全式金）2μL，TraansTaq?HiFi DNA Polymerase（全式金）0.5μL，cDNA 1μL，上下游引物各0.5μL，ddH2O 18μL.PCR扩增程序设置为94℃预变性3 min，94℃变性30 s，55-58℃退火60 s，72℃延伸90 s，34个循环，最后72℃延伸5 min.所用引物序列见表1.采用Gel/PCR Extraction Kit试剂盒（全式金）回收目的片段，链接pMD 18-T载体后转化DH5α感受态细胞，经菌液PCR鉴定后，筛选阳性克隆送至福州尚亚生物技术有限公司进行测序验证.