《表3 JAG2 siRNA片段碱基序列信息》

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《Notch信号通路在胰腺癌中的表达及其作用研究》


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依据GenBank提供的基因信息设计并筛选出3条JAG2 siRNA片段(表3),参照张波等[8]研究方法构建携带3条JAG2 siRNA片段的慢病毒表达载体,并按照吉凯转染试剂盒说明转染胰腺癌原代细胞(感染复数为10,感染条件为Eni.S+polybrene,病毒量:siRNA1 2μL、siRNA2 1.5μL、siRNA32μL),感染后按1∶2传3代培养;以GAPDH为内参,用实时定量PCR及Western blot法检测3组细胞中JAG2基因mRNA及蛋白的相对表达量,选择JAG2表达阻遏效果最好的细胞株用于后续研究。